Ievads parastajās mikrobu kultūras barotnēs (I)

Ievads parastajās mikrobu kultūras barotnēs (I)

Kultivēšanas barotne ir sava veida jaukta barības vielu matrica, kas mākslīgi sagatavota no dažādām vielām atbilstoši dažādu mikrobu augšanas vajadzībām, ko izmanto dažādu mikroorganismu kultivēšanai vai atdalīšanai.Tāpēc barības vielu matricai ir jāsatur barības vielas (tostarp oglekļa avots, slāpekļa avots, enerģija, neorganiskais sāls, augšanas faktori) un ūdens, ko var izmantot mikroorganismi.Atkarībā no mikroorganismu veida un eksperimenta mērķa ir dažādi barotņu veidi un sagatavošanas metodes.

Dažas eksperimentā izmantotās barotnes tiek ieviestas šādi:

Uztura agara barotne:

Barības agara barotne tiek izmantota parasto baktēriju pavairošanai un kultivēšanai, kopējā baktēriju skaita noteikšanai, baktēriju sugu un tīrkultūras saglabāšanai.Galvenās sastāvdaļas ir: liellopu gaļas ekstrakts, rauga ekstrakts, peptons, nātrija hlorīds, agara pulveris, destilēts ūdens.Peptons un liellopu gaļas pulveris nodrošina slāpekļa, vitamīnu, aminoskābju un oglekļa avotus, nātrija hlorīds var uzturēt līdzsvarotu osmotisko spiedienu, un agars ir barotnes koagulants.

Uztura agars ir visvienkāršākais barotnes veids, kas satur lielāko daļu barības vielu, kas nepieciešamas mikrobu augšanai.Uztura agaru var izmantot parastajai baktēriju kultūrai.

Asins agara barotne:

Asins agara barotne ir sava veida liellopu gaļas ekstrakta peptona barotne, kas satur defibrinētas dzīvnieku asinis (parasti trušu asinis vai aitas asinis).Tāpēc papildus dažādām barības vielām, kas nepieciešamas baktēriju kultivēšanai, tas var nodrošināt arī koenzīmu (piemēram, V faktoru), hēmu (X faktoru) un citus īpašus augšanas faktorus.Tādēļ asins barotni bieži izmanto, lai kultivētu, izolētu un saglabātu noteiktus patogēnos mikroorganismus, kas ir prasīgi uzturā.

Turklāt hemolīzes testam parasti izmanto asins agaru.Augšanas procesā dažas baktērijas var ražot hemolizīnu, lai sadalītu un izšķīdinātu sarkanās asins šūnas.Kad tie aug uz asins plāksnes, ap koloniju var novērot caurspīdīgus vai caurspīdīgus hemolītiskos gredzenus.Daudzu baktēriju patogenitāte ir saistīta ar hemolītiskajām īpašībām.Tā kā dažādu baktēriju ražotais hemolizīns ir atšķirīgs, atšķiras arī hemolītiskā spēja, un hemolīzes parādība uz asins plāksnītes ir atšķirīga.Tāpēc baktēriju identificēšanai bieži izmanto hemolīzes testu.

TCBS vide:

TCBS ir tiosulfāta citrāta žults sāls saharozes agara barotne.Patogēno vibrio selektīvai izolācijai.Peptonu un rauga ekstraktu izmanto kā pamata uzturvielas barotnē, lai nodrošinātu slāpekļa avotu, oglekļa avotu, vitamīnus un citus augšanas faktorus, kas nepieciešami baktēriju augšanai;Augstāka nātrija hlorīda koncentrācija var apmierināt vibrio halofilās augšanas vajadzības;Saharoze kā fermentējams oglekļa avots;Nātrija citrāts, augsta pH sārmaina vide un nātrija tiosulfāts kavē zarnu baktēriju augšanu.Govs žults pulveris un nātrija tiosulfāts galvenokārt kavē grampozitīvu baktēriju augšanu.Turklāt nātrija tiosulfāts nodrošina arī sēra avotu.Dzelzs citrāta klātbūtnē baktērijas var noteikt sērūdeņradi.Ja ir sērūdeņradi ražojošas baktērijas, uz plāksnes veidosies melni nogulumi;TCBS barotnes indikatori ir bromkrezolzilais un timolzilais, kas ir skābes bāzes indikatori.Bromkrezolzilais ir skābes bāzes indikators ar pH izmaiņu diapazonu no 3,8 (dzeltens) līdz 5,4 (zili zaļš).Ir divi krāsas maiņas diapazoni: (1) skābes diapazons ir pH 1,2–2,8, mainoties no dzeltenas uz sarkanu;(2) Sārmu diapazons ir pH 8,0–9,6, mainoties no dzeltenas uz zilu.

TSA siera sojas pupu peptona agara barotne:

TSA sastāvs ir līdzīgs barības agara sastāvam.Valsts standartā to parasti izmanto, lai pārbaudītu nosēdinātās baktērijas farmācijas rūpniecības tīrās telpās (zonās).Izvēlieties testa punktu pārbaudāmajā zonā, atveriet TSA plāksni un novietojiet to testa punktā.Paraugus ņem, kad tie dažādos laikos ir pakļauti gaisa iedarbībai ilgāk par 30 minūtēm, un pēc tam kultivē koloniju skaitīšanai.Dažādiem tīrības līmeņiem ir nepieciešams atšķirīgs koloniju skaits.

Muellera Hintona agars:

MH barotne ir mikrobu barotne, ko izmanto, lai noteiktu mikroorganismu rezistenci pret antibiotikām.Tā ir neselektīva barotne, kurā var augt lielākā daļa mikroorganismu.Turklāt sastāvdaļās esošā ciete var absorbēt baktēriju izdalītos toksīnus, tāpēc tas neietekmēs antibiotiku darbības rezultātus.MH barotnes sastāvs ir salīdzinoši brīvs, kas veicina antibiotiku difūziju, lai tajā varētu parādīties acīmredzama augšanas kavēšanas zona.Ķīnas veselības nozarē MH barotni izmanto arī zāļu jutības testam.Veicot zāļu jutības testu dažām īpašām baktērijām, piemēram, Streptococcus pneumoniae, barotnei var pievienot 5% aitu asiņu un NAD, lai apmierinātu dažādas uztura prasības.

SS agars:

SS agaru parasti izmanto selektīvai Salmonella un Shigella izolēšanai un kultivēšanai.Tas inhibē grampozitīvās baktērijas, lielāko daļu koliformu un proteus, bet neietekmē salmonellas augšanu;Nātrija tiosulfātu un dzelzs citrātu izmanto, lai noteiktu sērūdeņraža veidošanos, padarot kolonijas centru melnu;Neitrāls sarkans ir pH indikators.Skābi veidojošā fermentējošā cukura kolonija ir sarkana, un neraudzējošā cukura kolonija ir bezkrāsaina.Salmonella ir bezkrāsaina un caurspīdīga kolonija ar melnu centru vai bez tā, un Shigella ir bezkrāsaina un caurspīdīga kolonija.