Vai ultrafiltrācijas centrifūgas caurules var izmantot atkārtoti?Lūk, atbilde

Centrifūgas caurule ir vienkārša caurule, kas var izturēt lielu rotācijas ātrumu un spiedienu, piemēram, dažu paraugu atdalīšanu un supernatanta nogulumu atdalīšanu.Ultrafiltrācijas centrifūgas caurulei ir divas daļas, kas ir līdzīgas iekšējai caurulei un ārējai caurulei.Iekšējā caurule ir membrāna ar noteiktu molekulmasu.Ātrgaitas centrifugēšanas laikā tie, kuriem ir mazāka molekulmasa, noplūdīs apakšējā mēģenē (ti, ārējā mēģenē), un tie, kuriem ir lielāka molekulmasa, tiks iesprostoti augšējā mēģenē (ti, iekšējā caurulē).Šis ir ultrafiltrācijas princips, un to bieži izmanto paraugu koncentrēšanai.

Ultrafiltrācijas centrifūgas caurules parasti var izmantot bez pirmapstrādes, bet olbaltumvielu paraugu apstrādei, īpaši atšķaidītiem proteīna šķīdumiem (< 10 ug/ml), koncentrācijas atgūšanas ātrums ar ultrafiltrācijas membrānām bieži vien nav kvantitatīvs.Lai gan PES materiāli samazina nespecifisko adsorbciju, dažiem proteīniem, īpaši, ja tie ir atšķaidīti, var būt problēmas.Nespecifiskās saistīšanās pakāpe atšķiras atkarībā no atsevišķu olbaltumvielu struktūras.Proteīni, kas satur lādētus vai hidrofobus domēnus, visticamāk, neatgriezeniski saistās ar dažādām virsmām.Pasivācijas pirmapstrāde uz ultrafiltrācijas centrifūgas caurules virsmas var samazināt proteīna adsorbcijas zudumu uz membrānas virsmas.Vairumā gadījumu kolonnas pirmapstrāde pirms atšķaidītā proteīna šķīduma koncentrēšanas var uzlabot atgūšanas ātrumu, jo šķīdums var aizpildīt tukšās proteīna adsorbcijas vietas, kas atklātas uz membrānas un virsmas.Pasivēšanas metode ir kolonnu iepriekš mērcēt ar lielāku pasivācijas šķīduma tilpumu ilgāk par 1 stundu, rūpīgi nomazgāt kolonnu ar destilētu ūdeni un pēc tam vienu reizi centrifugēt ar destilētu ūdeni, lai pilnībā noņemtu pasivācijas šķīdumu, kas var palikt uz plēves. .Uzmanieties, lai pēc pasivēšanas plēve neizžūtu.Ja vēlaties to izmantot vēlāk, jums jāpievieno sterils destilēts ūdens, lai plēve būtu mitra.

Ultrafiltrācijas centrifūgas caurules parasti nevar sterilizēt un izmantot atkārtoti.Tā kā vienas mēģenes cena nav lēta, daudzi cenšas to izmantot atkārtoti – pieredze ir tāda, ka membrānas virsmu vairākas reizes tīra ar destilētu ūdeni un vienu vai divas reizes centrifugē.Mazo mēģeni, ko var centrifugēt pretējā virzienā, var iegremdēt destilētā ūdenī un pēc tam vairāk reižu centrifugēt atpakaļgaitā, kas būs labāk.To var izmantot vienam un tam pašam paraugam atkārtoti, un to var mērcēt destilētā ūdenī, kad to neizmanto, taču ir jānovērš baktēriju piesārņojums.Nejauciet dažādus paraugus.Daži cilvēki saka, ka mērcēšana 20% spirtā un 1n NaOH (nātrija hidroksīds) var novērst baktēriju augšanu un novērst izžūšanu.Kamēr ultrafiltrācijas membrāna iekļūst ūdenī, tai nedrīkst ļaut izžūt.Tomēr citi saka, ka tas iznīcinās membrānas struktūru.Jebkurā gadījumā ražotāji parasti neatbalsta atkārtotu izmantošanu.Atkārtota lietošana bloķēs filtra membrānas poru izmēru un pat izraisīs šķidruma noplūdi, kas ietekmēs eksperimenta rezultātus.